Механізми утворення цитотоксичних сполук у хворих на СOVID-19 та їхня роль у розвитку постковідних симптомів

Abstract

Мета роботи. Комплексно дослідити субпопуляцію CD56^dim CD16⁺ NK-клітин – головних ефекторів антитілозалежної клітинно- опосередкованої цитотоксичності (ADCC) – при гострій інфекції COVID-19, у фазі постковідного синдрому та в пацієнтів з аденокарциномою шлунка, порівняти механізми їхнього виснаження й обґрунтувати спільні імунотерапевтичні стратегії. Матеріали і методи. Обстежено 42 хворих на аденокарциному шлунка різних стадій; контроль – 25 умовно здорових донорів. Кількісний і фенотиповий аналіз NK-клітин (CD3⁻CD56⁺CD16⁺) здійснювали методом проточної цитометрії з використанням FITC-мічених моноклональних антитіл. Рівень інтерлейкіну-2 у сироватці визначали «сендвіч»-ІФА. Порівняльний аналіз даних COVID-19 виконано за результатами власного спостереження 30 госпіталізованих пацієнтів і мета-аналізу 48 сучасних публікацій. Результати. У хворих на рак шлунка кількість CD16⁺ NK-клітин та експресія CD16 знижувалися пропорційно стадії пухлини (p < 0,01); найменші значення зафіксовано у пацієнтів > 60 років. Сироватковий IL-2 був достовірно нижчим (296 ± 52 пг/мл) порівняно з контролем (612 ± 38 пг/мл) і позитивно корелював із відсотком CD16⁺ NK (r = 0,63). Ex vivo стимуляція IL-2 відновлювала експресію CD16 та ADCC-активність. При тяжкому COVID-19 спостерігали гострий «шединг» CD16, гіперекспресію NKG2A/PD-1 і різке падіння перфорину; у пацієнтів із Long COVID зберігалася дефіцитна частка CD16⁺ NK і гіпоактивний фенотип.

Objective. To perform an integrated analysis of CD56^dim CD16⁺ natural killer (NK) cells—the main effectors of antibody-dependent cellular cytotoxicity (ADCC)—during acute COVID-19 infection, long-COVID phase, and in patients with gastric adenocarcinoma; to compare exhaustion mechanisms and propose shared immunotherapeutic targets. Materials and methods. Forty-two patients with gastric adenocarcinoma at stages I–IV and 25 healthy donors were enrolled. Quantitative and phenotypic profiling of peripheral CD3⁻CD56⁺CD16⁺ NK cells was carried out by flow cytometry using FITC-labelled monoclonal antibodies. Serum interleukin-2 (IL-2) was measured by sandwich ELISA. COVID-19 data were obtained from our cohort of 30 hospitalized patients and a meta-analysis of 48 recent studies. Results. In gastric cancer, the absolute number of CD16⁺ NK cells and surface CD16 density declined with advancing tumour stage (p < 0.01), reaching the lowest values in patients over 60 years. Mean serum IL-2 was significantly reduced (296 ± 52 pg/ml vs 612 ± 38 pg/ml in controls) and positively correlated with the percentage of CD16⁺ NK cells (r = 0.63). Ex vivo IL-2 stimulation restored CD16 expression and ADCC capacity. Severe COVID-19 was characterised by rapid CD16 shedding, NKG2A/PD-1 over-expression and a sharp drop in perforin; long-COVID patients retained a diminished pool of hypofunctional CD16⁺ NK cells.