Перегляд за Автор "Гоэнага, М.В."

Зараз показуємо 1 - 3 з 3

Особенности первичной структуры красных флуоресцентных белков, изменяющих спектры флуоресценции во времени
(Харьковский Национальный Университет им. В.Н. Каразина, 2009) Субач, Ф.В.; Морозова, Е.С.; Субач, О.М.; Верхуша, В.В.; Буланкина, Н.И.; Гоэнага, М.В.
Путём направленного сайт-специфического и случайного мутагенеза мономерного красного флуоресцентного белка mCherry были оcзданы три мутантных белка, названных флуоресцентными таймерами (ФТ), которые, в отличие от исходного белка, изменяют со временем флуоресценцию с голубой на красную, и определены их первичные структуры. Выделенные мутантные белки отличаются друг от друга скоростями изменения спектров флуоресценции - большой (БФТ), средней (СФТ) и малой (МФТ). В сравнении с исходным mCherry БФТ содержит 5 аминокислотных замен. Среди них замены Лиз→Aрг, Лей→Tрп, Ала→Сер в позициях 69, 84 и 224 находятся внутри белковой молекулы, а Глу→Лиз, Сер→Tре в позициях 34 и 151 - на её внешней поверхности. В аминокислотной последовательности СФТ найдены 9 замен. Лиз→Aрг, Лей→Tрп, Meт→Илей, Лей→Meт в позициях 69, 84, 152 и 205 - внутренние, и Aсн→Aсп, Tре→Сер, Глн→Лиз, Tир→Цис, Aрг→Гис в позициях 23, 43, 194, 221 и 227- внешние. МФТ имеет только 4 мутации, из которых три: Лиз→Арг, Лей→Tрп, Aлa→Вал в позициях 69, 84 и 179 находятся во внутреннем пространстве молекулы, а одна, в позиции 30, Глу→Вал – на её поверхности. Рассмотрена структурная роль найденных внешних и внутренних аминокислотных замен в формировании флуоресцентных особенностей БФТ, СФТ и МФТ, которые отличают их как от mCherry, так и друг от друга.
Роль процессинга в возрастных изменениях термостабильности коллагена
(Харьковский Национальный Университет им. В.Н.Каразина, 2010) Эль Таалу, А.Б.; Перский, Е.Э.; Кот, Ю.Г.; Никитина, Н.А.; Гоэнага, М.В.
In vitro изучена связь между степенью гидроксилирования пролила и окислительного дезаминирования ε- NH2-групп лизила и гидроксилизила в коллагене и термостабильностью его надмолекулярных структур в коже крыс линии Вистар в постнанатальном онтогенезе. Показано, что повышаясь к 3-месячному возрасту, содержание этих свободных ε-NH2-групп в коллагене остаётся в дальнейшем постоянным, в то время как содержание свободных СОН-групп, начиная с 1-месяца, неуклонно уменьшается с возрастом. В соответствии с этим межмолекулярное поперечное связывание в коллагеновых надмолекулярных структурах снижается в период от 1 до 3 месяцев, после чего постоянно повышается до 24 месяцев. Содержание гидроксипролина в коллагене непрерывно снижается в постнатальном онтогенезе. Совместное действие обоих эффектов приводит к снижению термостабильности надмолекулярных коллагеновых структур в коже в период от 1 до 3 месяцев с дальнейшим её ростом до 24 месяцев.
Спектроскопическое исследование влияния деформации кожи на содержание шиффовых оснований в синтезирующемся коллагене типа I
(Харьковский Национальный Университет им. В.Н. Каразина, 2009) Костина, Т.В.; Кот, Ю.Г.; Гоэнага, М.В.; Никитина, Н.А.; Перский, Е.Э.
Перский In vіtro с помощью флуориметрии и ИК-спектрофотометрии исследовано влияние деформации соединительнотканных клеток кожи 3-месячных крыс при её механическом растяжении в диапазоне напряжений (0,075 – 0,18) МН/м2 на содержание шиффовых оснований в коллагене типа І, который синтезируется в этих условиях. Для выявления всех шиффовых оснований, которые могут возникнуть в коллагеновых надмолекулярных структурах, при наработке коллагена в инкубационную среду добавляли семикарбазид, аминогруппы которого путём конденсации с альдегидными группами аллизила и гидроксиаллизила образуют шиффовы основания уже в свежесинтезированном коллагене, не содержащим агрегаты молекул. Измерения спектров флуоресценции синтезированного коллагена типа І показало, что интенсивность полосы эмиссии с длиной волны 430 нм, характерной для шиффовых оснований, уменьшается при повышении напряжения в коже. В ИК-спектрах коллагена типа І проанализирована интенсивность полосы поглощения 1640 см-1, представляющая собой характеристическую частоту колебания шиффовых оснований в тройной спирали молекулы коллагена. Обнаружено, что интенсивность этой полосы поглощения в коллагене снижается с ростом напряжения, при котором он синтезируется в коже. Содержание шиффовых оснований в коллагеновых структурах обратнопропорционально величине механического напряжения в ткани и при его увеличении от 0 до 0,15 МН/м2 уменьшение их количества составляет 39,2% и 33,0% по данным флуориметрии и ИК-спектрофотометрии соответственно.